細(xì)胞培養(yǎng)知識|細(xì)胞換液幾種方式
培養(yǎng)細(xì)胞的過程中，換液是一項常規(guī)的操作，通過換液清除掉細(xì)胞在生長過程中產(chǎn)生的代謝廢物，補(bǔ)充新鮮的含血清培養(yǎng)基，使細(xì)胞能夠正常生長。換液前工作準(zhǔn)備環(huán)境準(zhǔn)備：相對密封、防塵、防菌的無菌室操作者準(zhǔn)備：雙手清潔呈可操作狀態(tài)物品準(zhǔn)備：超凈工作臺、CO2培養(yǎng)箱、裝有75%醫(yī)用消毒酒精的酒精噴壺、PBS緩沖液、含血清培養(yǎng)基、巴氏吸管、移液器、廢液缸。工作準(zhǔn)備：預(yù)熱完全培養(yǎng)基，酒精棉擦拭培養(yǎng)基瓶外表面后移入生物安全柜或超凈工作臺。細(xì)胞培養(yǎng)箱中取出的細(xì)胞，酒精棉擦拭培養(yǎng)瓶或
2023.09.04
細(xì)胞培養(yǎng)知識|懸浮細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)室里培養(yǎng)的細(xì)胞一般可以簡單地分為兩大類，貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞。貼壁細(xì)胞(adherent cells)指的是這類生長必須有可以貼附的支持物表面，只有依靠自身分泌的或培養(yǎng)基中提供的貼附因子才能在該表面上生長、繁殖的細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞在該表面生長后，一般會形成兩種形態(tài)，即成纖維樣細(xì)胞或者上皮樣細(xì)胞。而另一類則是細(xì)胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，這類細(xì)胞我們稱之為懸浮細(xì)胞。懸浮細(xì)胞在顯微鏡下觀察，一般是單個生長的大小均一的圓圓的、亮亮的形態(tài)規(guī)則的細(xì)
2023.08.01
TLC薄層點(diǎn)板常見問題與解決辦法
1、點(diǎn)樣是成功分離的關(guān)鍵，怎樣提高點(diǎn)樣效率？(1)點(diǎn)樣圓點(diǎn)小而圓，直徑盡量不要超過2mm；(2)在便于顯色的前提下，點(diǎn)樣量盡量少，同時就要注意點(diǎn)樣液體的濃度，防止過載拖尾；(3)點(diǎn)樣勿上薄層表面；(4)點(diǎn)樣圓點(diǎn)盡量遠(yuǎn)離薄層邊緣，至少相隔3mm，減少邊緣效應(yīng)；(5)所有點(diǎn)樣點(diǎn)盡量保持在一條與底邊平行的直線上，務(wù)必點(diǎn)交叉點(diǎn)；(6)點(diǎn)樣完成后，溶劑用吹風(fēng)機(jī)盡量吹干。2、兩個點(diǎn)離的太近怎么辦？(1)在展開劑中多次展多次；(2)增加展開劑的極性；(3)選擇不同體系的
2023.08.01
藻類培養(yǎng)基——植物組織培養(yǎng)
藻類培養(yǎng)基可由濃縮溶液或粉末鹽混合物制備而成。濃縮溶液組分較完整，包含維生素，應(yīng)冷凍保存。而粉末培養(yǎng)基則可以靈活地自定義培養(yǎng)基的最終組分。這類用于制備水生物種生長培養(yǎng)基的粉末由“富集”鹽混合物和完全合成培養(yǎng)基的鹽混合物組成。將粉末或濃縮溶液分別加入淡水或海水中以制備富含淡水或海水的培養(yǎng)基。為了制備合成海生生長培養(yǎng)基，將粉末添加到組織培養(yǎng)級淡水中。已公布的水生物種生長培養(yǎng)基配方通常含有碳酸氫鈉。我們的粉末混合物中不包含碳酸氫鈉，應(yīng)視需要添加在培養(yǎng)基中。從包裝
2023.07.21
細(xì)胞生長緩慢的原因解析
一、培養(yǎng)體系問題1、檢查細(xì)胞是否存在污染。(1)如果培養(yǎng)細(xì)胞時未添加抗生素，細(xì)胞污染則是不可避免的。①用肉眼和顯微鏡進(jìn)行檢查。②如果細(xì)胞被污染則要棄掉。(2)支原體污染不易察覺，因此需要進(jìn)行定期檢測。(3)檢查可能造成污染的途徑和原因。2、檢查用于培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基和血清(例如批次廠商是否相同)。3、如果排除問題與培養(yǎng)基無關(guān)，那么可能還是細(xì)胞存在問題。(1)復(fù)蘇另一支凍存的細(xì)胞，與正在培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行比較。但是需要注意的是兩種細(xì)胞的培養(yǎng)應(yīng)分開，以免在培養(yǎng)之初就
2023.07.11
產(chǎn)品說明書|固相萃取固定化親和色譜微球
英文名稱：SPE-Ti-IMAC, 100%中文名稱：固相萃取固定化親和色譜微球保存條件：室溫儲存，保質(zhì)期為五年。適用范圍：本產(chǎn)品適用于對磷酸肽的鑒定和富集。自備材料：•樣品：蛋白酶解液注意：蛋白酶解液中不能含有干擾磷酸肽富集的物質(zhì)，如 EDTA等絡(luò)合劑、含磷酸根的緩沖鹽！•Loading buffer：80%ACN / 6%TFA水溶液作用：將酶解液酸化，高濃度的 TFA-可以抑制酸性肽段的殘留•Wash buffer
2022.12.07
常用病毒滅活劑β-丙內(nèi)酯(BPL)與甲醛對比
滅活是指破壞病原體的生物學(xué)特性，但盡可能避免影響其免疫原性或破壞血清中補(bǔ)體活性的過程。常用的病毒滅活劑有β-丙內(nèi)酯(BPL)和甲醛。β-丙內(nèi)酯(BPL)為四元環(huán)內(nèi)酯類有機(jī)化合物，無色液體，略帶甜味。BPL具有高反應(yīng)性，易水解，可與羥基，氨基，羧基，巰基和酚基反應(yīng)。BPL曾被用作組織移植物和血漿的消毒劑、塑料聚合行業(yè)的單體、及丙酸酯化合物合成的中間體。由于存在致癌性，BPL在這些行業(yè)的使用已減少，但仍被廣泛應(yīng)用于各種疫苗滅活。BPL與傳統(tǒng)滅活劑甲醛的比較對比
2022.10.21
寡核苷酸LC分析緩沖液和添加劑選擇
寡核苷酸(Oligonucleotide)，是一類只有20個以下堿基對的短鏈核苷酸的總稱(包括脫氧核糖核酸DNA或核糖核酸RNA內(nèi)的核苷酸)，寡核苷酸可以很容易地和它們的互補(bǔ)對鏈接，所以常用來作為探針確定DNA或RNA的結(jié)構(gòu)，經(jīng)常用于基因芯片、電泳、熒光原位雜交等過程中。LC-MS是眾多寡核苷酸生物分析方法中的一種。由于寡核苷酸屬于酸性強(qiáng)極性化合物，因此在一般色譜柱上很難保留。離子對反相色譜法是較為常用的一種方法，離子對試劑可以增強(qiáng)寡核苷酸在反相色譜上的保
2022.09.15
活體成像試劑之熒光素
生物化學(xué)發(fā)光檢測是活體成像技術(shù)之一。生物化學(xué)發(fā)光法是基于熒光素酶能催化底物化學(xué)發(fā)光的原理，將體外能穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞株植入動物體內(nèi)，與后期注射入體內(nèi)的底物發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生ATP，生成激發(fā)態(tài)的氧化熒光素，當(dāng)回復(fù)至基態(tài)時多余的能量以光子形式釋放，再利用光學(xué)系統(tǒng)檢測光強(qiáng)度，間接反映出細(xì)胞數(shù)量的變化或細(xì)胞的定位。該技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于多個領(lǐng)域，例如腫瘤或疾病動物模型的建立，還可用于病毒學(xué)研究、siRNA研究、干細(xì)胞研究、蛋白質(zhì)相互作用研究等。常見的熒光素酶有兩種，分
2022.09.15
實(shí)驗(yàn)室玻璃和塑料器具的清洗方法
為防止實(shí)驗(yàn)室玻璃和塑料器具粘上化學(xué)物質(zhì)導(dǎo)致粘附殘留物從而導(dǎo)致器具損壞，在使用后應(yīng)立即清洗。下面小編就簡單說說有哪些清洗方法。1、擦拭和刷洗一般來說擦拭和刷洗方法是使用一塊在清洗劑中充分浸泡的布或者海綿繼進(jìn)行清洗的方法。注意：實(shí)驗(yàn)器具一定不能使用具有研磨效果的洗滌劑進(jìn)行清洗，以免損傷器具表面。2、浸泡該方法是將實(shí)驗(yàn)器具在室溫下泡入洗滌劑約20～30分鐘，然后使用流動水沖洗，最后再使用蒸餾水清洗。如有頑固殘留物，可升高浸泡溫度與延長浸泡時間。有條件的實(shí)驗(yàn)室，可
2022.08.29
